• 欢迎来到美国APExBIO中文站,专注小分子抑制剂、激动剂、拮抗剂及化合物库!

 


加 微 信 得 红 包
ApexBio
Search Site
相关产品
KU-0063794mTORC1和mTORC2的抑制剂

KU-0063794

产品编号:A5078
ApexBio 的所有产品仅用作科研,我们不为任何个人用途提供产品和服务

电话: 021-55669583

Email: sales@apexbio.cn

全球经销商

Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.

质量控制

化学结构

KU-0063794

KU-0063794 Dilution Calculator

Concentration (start)
x
Volume (start)
=
Concentration (final)
x
Volume (final)
 
 
 
C1
V1
C2
V2

calculate

KU-0063794 Molarity Calculator

Mass
=
Concentration
x
Volume
x
MW*
 
 
 
g/mol

calculate

化学性质

CAS号 938440-64-3 SDF Download SDF
化学名 [5-[2-[(2R,6S)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]-4-morpholin-4-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methoxyphenyl]methanol
SMILES CC1CN(CC(O1)C)C2=NC3=C(C=CC(=N3)C4=CC(=C(C=C4)OC)CO)C(=N2)N5CCOCC5
分子式 C25H31N5O4 分子量 465.54
溶解度 ≥11.65mg/mL in DMSO, <2.35 mg/mL in EtOH, <2.31 mg/mL in H2O 储存条件 Store at -20°C
物理性状 A solid 运输条件 试用装:蓝冰运输。
其他可选规格:常温运输或根据您的要求用蓝冰运输。
一般建议 为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

生物活性

Description KU-0063794 is a potent and highly specific dual-mTOR inhibitor of mTORC1 and mTORC2 with IC50 of ~10 nM.
Targets mTORC1 mTORC2        
IC50 ~10 nM ~10 nM        

实验操作

激酶实验 [1]:

mTOR 复合物激酶实验

使用Hepes裂解液裂解HEK-293细胞。使用结合了免疫前抗体IgG的G蛋白琼脂糖凝胶 (5 ~ 20 μL),对溶解产物 (1 ~ 4 mg) 进行预处理。再将裂解提取物与结合了抗Rictor抗体、抗Raptor抗体或免疫前抗体IgG (5 ~ 20 μg) 的G蛋白琼脂糖凝胶 (5 ~ 20 μL)一起孵育。所有抗体共价结合到G蛋白琼脂糖凝胶上。在振动转载台上,免疫沉淀于4 °C下进行1小时。使用Hepes裂解液冲洗免疫沉淀物4次,随后使用Hepes激酶缓冲液冲洗2次。对于Raptor免疫沉淀物(用于S6K1磷酸化),在最初的2次冲洗中,缓冲液含0.5 M NaCl,以保持激酶的最佳活性。血清饥饿的 HEK-293细胞中分离的GST-Akt1与PI-103(1 μM 进行 1 小时)温育。将血清饥饿的HEK-293细胞与PI-103(1 μM,1小时)孵育,分离GST-Akt1。将血清饥饿的HEK-293细胞与Rapamycin(1 μM,1小时)孵育,分离GST-S6K1。在KU-0063794和GST-Akt1 (0.5 μg) 或GST-S6K1 (0.5 μg) 存在或不存在的情况下,加入0.1 mM ATP和10 mM MgCl2,开始mTOR反应。在30 °C下,反应在振动转载台上进行30分钟。然后加入SDS样本缓冲液终止反应。使用0.22 μm孔径大小的Spin-X过滤器将反应混合物过滤,样本进行电泳处理,然后进行免疫印迹分析。

细胞实验 [1]:

细胞系

野生型和mLST8缺陷型MEFs

制备方法

在DMSO中的溶解度有限。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37 °C加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20 °C可放置数月。

反应条件

~ 3 μM;24、48和72小时

实验结果

在野生型和mLST8缺陷型MEFs中,KU-0063794抑制细胞生长。

References:

[1]. Garcia-Martinez J, Moran J, Clarke R, et al. Ku-0063794 is a specific inhibitor of the mammalian target of rapamycin (mTOR)[J]. Biochem. J, 2009, 421: 29-42.

产品描述

Ku-0063794是一种特异性的mTOR抑制剂,对mTORC1和mTORC2抑制的IC50值大约为10 nM[1]。

mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)蛋白激酶位于信号通路的关键位置,调节细胞生长和增殖。各种癌驱动基因突变,如受体酪氨酸激酶、RAS、PI3K(磷酸肌醇3-激酶)和PTEN,通过活化mTOR激酶诱导增殖、生长和存活。mTOR通过磷酸化和促进AGC家族激酶的激活促进细胞生长,AGC是蛋白激酶A 、蛋白激酶G和蛋白激酶C等的统称,主要有Akt(蛋白激酶B)、S6K(P70核糖体S6激酶)和SGK(血清和糖皮质激素蛋白激酶)。mTORC1磷酸化S6K的疏水残基,而mTORC2磷酸化Akt和SGK的疏水残基。Ku-0063794在体外和体内同时抑制mTORC1和mTORC2,可用于解析mTOR途径的细胞功能[1]。

在HEK-293细胞中,Ku-0063794抑制内源性免疫沉淀的mTORC1和mTORC2的活性,其以S6K1和Akt为底物,IC50值大约为10 nM。Ku-0063794可快速抑制S6K1活性和磷酸化,浓度100-300 nM 的Ku-0063794完全抑制氨基酸诱导的S6K1和S6蛋白的磷酸化。Ku-0063794抑制Akt苏氨酸308位点的磷酸化。Ku-0063794对其他靶蛋白的作用也进行了评估。然而,它不抑制检测的76种其它蛋白激酶以及七个脂质激酶,包括1a类PI3Kα和PI3Kβ[1,2]。

在转导表达BCR/ABL的反转录病毒载体的造血细胞进行骨髓重建的小鼠中,用获得的原代CML细胞进行甲基纤维素集落实验,评估Ku-0063794对PI3K信号通路的抗白血病作用。结果表明,1000 nM 的Ku-0063794完全抑制原代小鼠CML的集落形成。此外,在表达不依赖于其突变状态的BCR/ABL的BA/F3细胞中,Ku-0063794显著减少细胞增殖。Ku-0063794是理想的治疗策略,可以影响BCR/ABL下游的致癌基因信号[2]。

参考文献:
1. Garcia-Martinez J, Moran J, Clarke R, et al. Ku-0063794 is a specific inhibitor of the mammalian target of rapamycin (mTOR)[J]. Biochem. J, 2009, 421: 29-42.
2. Schuster K, Zheng J, Arbini A A, et al. Selective targeting of the mTORC1/2 protein kinase complexes leads to antileukemic effects in vitro and in vivo[J]. Blood cancer journal, 2011, 1(9): e34.